(一)标本采集

急性精囊炎可采集患者的分段(三段)尿液、尿道分泌物标本,有精囊肿大及波动者可采集会阴穿剌抽吸液标木。对于慢性精囊炎患者通常可采集分段尿液和精液或精囊前列腺按摩液标本,也可令患者首先排尿后再采集精液标本或进行精囊直肠指诊和采集精囊前列腺按摩液标本。

(二)涂片镜检

尿道分泌物、精液、精囊前列腺按摩液或尿液离心沉淀物标本可直接涂片,经革兰染色或抗酸染色后镜检。观察细菌等病原体的形态或染色性,有助于初步诊断和指导进一步的分离培养与鉴定。

(三)分离培奍

1.细菌感染分离培养分别取分段尿液标本、尿道分泌物标本、精囊油吸液标本或分段尿液与精囊前列腺按摩液标本0.1ML接种于血琼脂培养基平板或LIN病奈瑟菌分离培养基平板,置普通温箱或烛缸或CO2温箱内37℃:培养24-48小时后观察细菌生长情况。根据培养物的菌落特征及其革兰染色形态、生化反应或血清学反应进行菌种或菌型的鉴定,LIN病奈瑟菌及其稳定L型的分离培养物也可采用PCR的方法进行特异性基因鉴定。

2.结核分支杆菌的分离培养将精液标本、尿液离心沉淀物标本、精囊抽吸液标本或精囊前列腺按摩液标本接种0.1ML于改良罗氏培养基或苏通培养基,置温箱内37℃培养1-3周后,观察培养物的菌落特征及其抗酸染色形态以及生化反应进行菌种或菌型的鉴定也可采用PCR的方法对结核分支杆菌及其稳定L型培养物进行特异性基因的检测与鉴定。

3.无芽胞厌氧菌感染的分离培养首先取标本涂片和革兰染色镜检,然后以细菌感染分离培养的方法将标本分别接种与两套血琼脂或厌氧菌分离培养基平板,分别置温箱、厌氧罐或厌氧箱内进行有氧和无氧培养。根据涂片染色镜检有菌、无氧分离培养有菌、有氧分离培养无菌的特征确定培养物是否为无芽胞厌氧菌,再根据培养物的生化反应特征进行菌种或菌型的鉴定。

由于正常男性的尿道粘膜及阴茎与会阴部皮肤常常可有无芽胞厌氧菌寄居,因此采集标本和进行分离培养时应当注意无菌操作,以避免造成分离培养的假阳性结果。

4.寄生虫感染的分离培养通常根据阴道毛滴虫或阿米巴原虫的形态进行鉴定,特殊情况下可将标本接种于DIAMONDTYM培养基或CPLM培养基分离培养阴道毛滴虫,接种琼脂蛋白胨双相培养基分离培养阿米巴原虫。

5.细菌L型的分离培养对于那些近期或正在接受-内酰胺类抗生素以及其他某些抗菌藥物不规范治疗的慢性精囊炎患者或病情缓解的急性精囊炎患者,尤其需要注意进行细菌L型的分离培养。可将精液标本、精囊抽吸液标本或精囊前列腺按摩液标本直接定量接种于L型软琼脂平板进行高渗分离培养,也可将标本经前处理后接种于PG液、肉浸液或苏通液体培养基进行非高渗分离培养。根据细菌L型的形态、生长特性、代谢活性、滤过性等确定是否有细菌L型的存在,通过返祖试验获得返祖菌株后以常规细菌学方法进行菌种或菌型的鉴定,LIN病奈瑟菌、结核分支杆菌等细菌的稳定L型可采用PCR的方法进行特异性基因鉴定。

(四)藥物敏感试验

对于从患者标本中分离的病原性细菌一般要求进行藥物敏感试验,检测细菌的藥物敏感性以指导临床选择使用抗菌藥物。但对于结核分支杆菌、细菌L型感染者,可根据具体情况确定是否进行藥物敏感试验。

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